產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

BCA 蛋白濃度測(cè)定試劑盒

BCA 蛋白濃度測(cè)定試劑盒(BCA Protein Assay Kit)是根據(jù)目前世界上最常用的兩種蛋白濃度檢測(cè)方法之一 BCA 法研制而成，實(shí)現(xiàn)了蛋白濃度測(cè)定的簡(jiǎn)單，高穩(wěn)定性，高靈敏度和高兼容性。

產(chǎn)品特性：

1、靈敏度高：檢測(cè)濃度下限 25μg/ml，最小檢測(cè)蛋白量達(dá)到 0.5μg，待測(cè)樣體積為 1-20μl；

2、在 50-2000μg/ml 濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系。

3、BCA 法測(cè)定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響，可以兼容樣品中高達(dá) 5%的 SDS，

5%的 Triton X-100，5%的 Tween 20, 60, 80。但受螯合劑和略高濃度的還原劑的影響，需確保EDTA 低于 10mM，無 EGTA，二硫蘇糖醇低于 1mM，β-巰基乙醇低于 0.01%。

4、不適用 BCA 法時(shí)建議試用優(yōu)選生產(chǎn)的 Bradford 蛋白濃度測(cè)定試劑盒。

包裝清單：

產(chǎn)品編號(hào) 產(chǎn)品名稱 包裝

P0012-1 BCA 試劑 A 100ml

P0012-2 BCA 試劑 B 3ml

P0012-3 蛋白標(biāo)準(zhǔn)(50mg/ml BSA) 1ml

說明書 1 份

保存條件：

BCA 試劑 A 和 B 室溫保存，蛋白標(biāo)準(zhǔn)請(qǐng)-20℃凍存。本試劑盒自訂購(gòu)之日起一年內(nèi)有效。

注意事項(xiàng)：

需酶標(biāo)儀一臺(tái)，測(cè)定波長(zhǎng)為 540-595nm 之間，562nm 最佳。需 96 孔板。如果沒有酶標(biāo)儀，也可以使用普通的分光光度計(jì)測(cè)定，但測(cè)定時(shí)，需根據(jù)比色皿的最小檢測(cè)體積，適當(dāng)加大 BCA 工作液的用量使不小于最小檢測(cè)體積，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品的用量可相應(yīng)按比例放大也可不變。

使用分光光度計(jì)測(cè)定蛋白濃度時(shí)，每個(gè)試劑盒可以測(cè)定的樣品數(shù)量可能會(huì)顯著減少。  為了加快 BCA 法測(cè)定蛋白濃度的速度可以適當(dāng)用微波爐加熱，但是切勿過熱。

EDTA 濃度必須小于 10mM，不兼容 EGTA。

不適用 BCA 法時(shí)，請(qǐng)?jiān)囉?Bradford 蛋白濃度測(cè)定試劑盒。

為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用說明：

1.根據(jù)樣品數(shù)量，按 50 體積 BCA 試劑 A 加 1 體積 BCA 試劑 B(50:1)配制適量 BCA 工作液，充分混勻。BCA 工作液室溫 24 小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。

2.完全溶解蛋白標(biāo)準(zhǔn)品，取 10μl 稀釋至 100μl，使終濃度為5mg/ml。蛋白樣品在什么溶液中，標(biāo)準(zhǔn)品也宜用什么溶液稀釋。但是為了簡(jiǎn)便起見，也可以用 0.9%NaCl 或 PBS 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。

3.將標(biāo)準(zhǔn)品按 0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20μl 加到 96 孔板的標(biāo)準(zhǔn)品孔中，加用于稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的溶液補(bǔ)足到 20μl。

4.加適當(dāng)體積樣品到 96 孔板的樣品孔中，加用于稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的溶液到 20μl。

5.各孔加入 200μl BCA 工作液，37℃放置 30 分鐘。

注: 也可以室溫放置 2 小時(shí)，或 60℃放置 30 分鐘。BCA 法測(cè)定蛋白濃度時(shí)，吸光度會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)不斷加深。并且顯色反應(yīng)會(huì)因溫度升高而加快。如果濃度較低，適合在較高溫度孵育，或延長(zhǎng)孵育時(shí)間。

6.測(cè)定 A562，540-595nm 之間的波長(zhǎng)也可接受。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出蛋白濃度。

常見問題：

1. 測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)發(fā)現(xiàn)隨著標(biāo)準(zhǔn)品濃度的增加吸光度或顏色沒有明顯變化。 可能的原因是樣品中含有嚴(yán)重干擾 BCA 法測(cè)定蛋白濃度的物質(zhì)。

2.是否每次測(cè)定時(shí)都需要做標(biāo)準(zhǔn)曲線？

建議每次測(cè)定時(shí)都做標(biāo)準(zhǔn)曲線。因?yàn)?BCA 法測(cè)定時(shí)顏色會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)不斷加深，并且顯色反應(yīng)的速度和溫度有關(guān)，所以除非精確控制顯色反應(yīng)的時(shí)間和溫度，否則如需精確測(cè)  定宜每次都做標(biāo)準(zhǔn)曲線。