李勁松研究員2007結(jié)束在洛克菲勒大學(xué)的博士后研究，回國擔(dān)任生化細(xì)胞所研究所研究員，研究組長，先后獲得“百人計(jì)劃”，“杰出青年基因”支持，研究成果2011年和2012年兩次入選“中國科學(xué)十大進(jìn)展”，率先建立小鼠的孤雄單倍體胚胎干細(xì)胞，并首次將Crispr-cas9技術(shù)應(yīng)用于小鼠白內(nèi)障疾病即個(gè)體水平的治療。

精子不能用于遺傳操作限制了人們對它的深入研究，那么是否能找到一種和精子一樣都是單倍體的細(xì)胞來代替精子使卵母細(xì)胞受精呢？伴隨著這個(gè)問題的提出，李老師帶領(lǐng)大家走進(jìn)了小鼠單倍體胚胎干細(xì)胞的世界。首先，李老師從單倍體的產(chǎn)生歷史開始，簡要介紹了小鼠孤雄單倍體胚胎干細(xì)胞的產(chǎn)生的兩種方法（分別是去除卵細(xì)胞核，注入精子，或者去除受精卵雄原核，分別體外發(fā)育到囊胚建系而來）。孤雄單倍體配體干細(xì)胞遺傳物質(zhì)來自于精子，帶有一定雄性印記，可以使卵子受精，產(chǎn)生小鼠，稱之為“半克隆小鼠”。毫無疑問，孤雄單倍體的建立，相當(dāng)于獲得了可以體外進(jìn)行遺傳操作的“人造精子”。但李教授表示，單倍體的“受精能力”很低（半克隆小鼠出生效率大約4%，且其中一半發(fā)育阻滯），且會隨細(xì)胞的傳代逐漸丟失，通過將調(diào)控雄性印記的H19和Gtl2表達(dá)的H19-DMR和Gtl2-DMR敲除后，半克隆小鼠出生效率能提高到20%多，且基本無發(fā)育阻滯小鼠。

隨后一部分，李老師介紹了這種“人造精子”的應(yīng)用價(jià)值。通過結(jié)合近年來興起的Crispr-cas9基因編輯技術(shù)，單倍體可廣泛應(yīng)用于科學(xué)研究。首先，利用這種“人造精子”，可以獲得多基因敲除和敲入小鼠模型。其次，利用H19-DM和Gtl2-DMR雙敲的孤雄單倍體攜帶CRISPR-Cas9文庫能一步產(chǎn)生大量雜合及雙鏈突變小鼠，建立了可以用于個(gè)體水平遺傳篩選的新工具，等等。

最后，李勁松教授介紹了卵子來源“人造精子”的建立，食蟹猴孤雌單倍體干細(xì)胞的建立以及人的孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞的建立的工作。其中，卵子來源“人造精子”的建立得益于長期傳代中，孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞的雌性印記逐漸丟失，隨后通過將H19-DMR和Gtl2-DMR敲除，也可使孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞獲得高效的使卵子受精的能力。

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